等吸收法：在λ1的左右各選一點為λ2和λ3，使aλ2= aλ3=6/7 aλ1.維生素a醇。
③雜質(zhì)吸收：對維生素a的測定有影響的雜質(zhì)主要有：
維生素a2和維生素a3；維生素a的氧化產(chǎn)物（環(huán)氧化物、維生素a醛和維生素a酸）；維生素a在光照下產(chǎn)生的無生物活性的聚合物鯨醇；維生素a的異構(gòu)體；合成時產(chǎn)生的中間體。
④測定方法：第一法（使用于維生素a醋酸酯）
取維生素a醋酸酯，精密稱定，加環(huán)己烷制成每1ml中含9～15單位的溶液。然后在300、316、328、340、360nm五個波長處分別測定吸收值，確定最大吸收波長（應(yīng)為328nm）。計算各波長下的吸收度與328nm波長下的吸收度的比值。
計算：
a.求吸收系數(shù)，吸收系數(shù)＝a/cl. b.求效價（u/g），u/g＝吸收系數(shù)×1900 1900為維生素a醋酸酯在環(huán)己烷溶液中測定的換算因數(shù)。
3.求維生素a醋酸酯膠丸為標(biāo)示量的百分含量。
標(biāo)示量%＝（a×d×1900×w）/（w×100×l×標(biāo)示量）
1u=0.344μg維生素a醋酸酯1u=0.300μg維生素a醇4.a值的選擇法第二法（適用于維生素a醇）
說明：
⑴維生素a醋酸酯的吸收度校正公式是用直線方程法（即代數(shù)法）推導(dǎo)出來的；維生素a醇的吸收度校正公式是用相似三角形法（幾何法或成6/7定位法）推倒出來。
⑵在應(yīng)用三點校正法時，除其中一點在最大吸收波長處測定外，其余兩點均在最大吸收峰的兩側(cè)上升或下降陡部的波長處進行測定。
維生素e維生素e（消旋-α-生育酚醋酸酯）有天然片和合成品之分，天然品為右旋體（d-α）；合成品為消旋體（dl-α）。
結(jié)構(gòu)：維生素e為苯丙二氫吡喃醇衍生物，苯環(huán)上又一個乙酰化的酚羥基，故又稱生育酚。他主要有α、β、γ、δ四種異構(gòu)體，其中以α異構(gòu)體的生理作用最強。
性質(zhì)：
溶解性：微黃色或黃色透明的粘稠液體，易溶于乙醇、丙酮、乙醚、石油醚，不溶于水。
具有紫外吸收。
在無氧或其它氧化劑存在時，在酸性或堿性溶液中，加熱可水解生成游離生育酚；在有氧或其它氧化劑存在時，則進一步氧化生成醌型化合物。在堿性條件下加熱，這種氧化作用更易發(fā)生。
鑒別試驗：
⑴硝酸反應(yīng)：取本品約30mg，加無水乙醇10ml溶解后，加硝酸2ml，搖勻，在75℃加熱約15min，溶液應(yīng)顯橙紅色。
⑵水解后氧化反應(yīng)：取本品約10mg，加醇制氫氧化鉀試液2ml，煮沸5min，放冷，加水4ml與乙醚10ml，振搖、靜置使分層，取乙醚液2ml，加2，2‘-聯(lián)吡啶的乙醇溶液（0.5→100）數(shù)滴和三氯化鐵的乙醇溶液（0.2→100）數(shù)滴，應(yīng)顯血紅色。
⑶紫外光譜法。
⑷薄層色譜法。
特殊雜質(zhì)：
游離維生素e.利用游離維生素e的還原性，用硫酸鈰滴定液（0.01mol/l）滴定，以二苯胺為指示劑，限量為2.15%.含量測定：
⑴氣相色譜法：載氣：氮氣；固定相：硅酮（ov-17），涂布于經(jīng)酸洗并硅烷化處理的硅藻土或高分子小球上；檢測器：氫火焰離子化檢測器；理論板數(shù)：按維生素e峰計算應(yīng)不低于500；維生素e與內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的分離度應(yīng)大于2.內(nèi)標(biāo)：正三十二烷。
⑵高效液相色譜法：c18柱；流動相為甲醇：水（49：1）；紫外檢測器；波長292nm.維生素b1結(jié)構(gòu)：維生素b1（鹽酸硫胺）是由氨基嘧啶環(huán)和噻唑環(huán)通過央甲基連接而成的季銨化合物，噻唑環(huán)上季銨及嘧啶環(huán)上氨基，為兩個堿性基團，可與酸成鹽。
性質(zhì)：
溶解性：本品在水中易溶，水溶液顯酸性反應(yīng)。在乙醇中微溶，在乙醚中不溶。
具有紫外吸收。
在堿性中遇氧化劑，如鐵氰化鉀，可被氧化為具有熒光的硫色素，后者溶液正丁醇中呈藍色熒光。
分子中含有兩個雜環(huán)，故可與某些生物堿沉淀試劑反應(yīng)生成組成恒定的沉淀。
鑒別試驗⑴硫色素反應(yīng)方法：取本品約5mg，加氫氧化鈉試液2.5ml溶解后，加鐵氰化鉀試液0.5ml與正丁醇5ml，強力振搖2min，放置使分層，上面的醇層顯強烈的藍色熒光。加酸使成酸性，熒光即消失。再加堿使成堿性，熒光又顯出。
原理：維生素b1在堿性溶液中，可被鐵氰化鉀氧化生成硫色素。硫色素溶于正丁醇（或異丁醇等）中，顯藍色熒光。
⑵沉淀反應(yīng)維生素b1與碘化汞生成淡黃色沉淀維生素b1與碘生成紅色沉淀維生素b1與硅鎢酸生成白色沉淀含量測定方法有：硅鎢酸重量法、硫色素?zé)晒夥ā⒎撬芤旱味ǚê妥贤夥止夤舛确ā?/p>
中國藥典收載紫外分光光度法維生素c結(jié)構(gòu)：維生素c分子結(jié)構(gòu)中具有二烯醇結(jié)構(gòu)和內(nèi)酯環(huán)，且有二個手性碳原子（c4、c5），因此不僅使維生素c性質(zhì)極為活潑，且具旋光性。
性質(zhì)：
溶解性：維生素c在水中易溶，水溶液呈酸性，在乙醇中略溶，在氯仿或乙醚中不溶。
結(jié)構(gòu)遇糖類相似，也具糖的性質(zhì)。
分子中二烯醇基具極強的還原性，易被氧化為二酮基而成為去氫抗維生素c，加氫又可還原為維生素c.在堿性溶液或強酸性溶液中能進一步水解為二酮古羅糖酸。
c3-oh由于受共軛效應(yīng)的影響，酸性較強；c2-oh的酸性極弱，故維生素c一般表現(xiàn)為一元酸，能與碳酸氫鈉作用生成鈉鹽。
分子中有兩個手性碳原子，故有四個光學(xué)異構(gòu)體，其中l(wèi)（+）-維生素c活性最強。
維生素c和碳酸鈉作用可生成單鈉鹽，不致發(fā)生水解，因雙鍵使內(nèi)酯環(huán)變得較穩(wěn)定；但在強堿中，內(nèi)酯環(huán)可水解，生成酮酸鹽。
維生素c有共軛雙鍵，在稀礦酸溶液中，在245nm波長處有最大吸收；若在中性或堿性條件下，則紅移至265nm處。