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人豬流感(H1N1)病例標本采集和實驗室檢測指南

人豬流感(H1N1)病例標本采集和實驗室檢測指南

  豬流行性感冒( h1n1病毒)病毒的檢測

  所有豬流行性感冒( h1n1病毒)疑似病例應該采集上呼吸道標本來檢測豬流行性感冒( h1n1病毒)的病毒。

  推薦采集的呼吸道標本:

  疾病發病后應盡快采集如下標本:鼻咽拭子/吸取物或者鼻腔沖洗液/吸取物。如果不能收集這些標本,可合并鼻拭子與口咽拭子。氣管插管的病人也應收集氣管吸取物。標本應置于無菌病毒運輸液( vtm ) ,并立即用冰塊或冰排保存或置于4 ℃ (冰箱),并馬上運送至實驗室。臨床樣品收集人員及實驗室人員的感染控制指導請見相關文件。

  拭子

  理想的情況下,標本應使用頭部為合成纖維的拭子(例如,聚酯纖維 ),用鋁或塑料做桿。不推薦棉拭子和木桿。不能用海藻酸鈣做的拭子收集標本。標本采集管應包含3毫升病毒運輸液(例如,含有蛋白質穩定劑,阻止細菌和真菌生長的抗生素,緩沖液) 。

  臨床標本儲存

  所有呼吸道標本應保存在4℃ ,并盡快放置在-70℃。如果沒有-70℃度冰箱,標本應保存在4℃ ,但不應超過4天。 

  臨床標本運輸

  臨床標本應按照a類包裝要求運送,并用干冰運輸。

  所有標本應標示清楚。疑似病例標本運送應包含的信息請參照禽流感標本運輸。

  檢測程序

  呼吸道標本應首先應用real time rt-pcr方法檢測a型流感病毒的m基因、swine( h1n1)的ha基因和np基因,以及質控對照rnp基因。同時,接種mdck細胞或spf雞胚進行病毒分離,并測定病毒的全基因組序列。

  推薦的檢測方法

  用real-time rt-pcr方法檢測豬流行性感冒( h1n1病毒)病毒。

  其他檢測方法 

  快速流感抗原檢測

  一些商用快速檢測可以區分a和b型流感病毒 。快速檢測實驗a型流感陽性的病例符合可能病例的標準(見上文) 。這些實驗對檢測人感染豬流行性感冒( h1n1病毒)病毒臨床標本的敏感性和特異性未知,而且檢測季節性流感病毒的靈敏度不佳。因此,快速檢測陰性結果可能是假陰性,不能作為豬流感感染的最后診斷。

  免疫熒光法(或裝配的ifa )

  免疫熒光試驗可以區分a和b型流感病毒 。檢測a型流感陽性的病例符合可能病例的標準(見上文)。免疫熒光試驗的結果取決于臨床標本的質量,操作技能,對檢測人感染豬流行性感冒( h1n1病毒)病毒臨床標本的敏感性和特異性未知。因此,免疫熒光試驗陰性結果可能是假陰性,不能作為豬流感感染的最后診斷。

  病毒培養

  可用mdck細胞和spf雞胚分離豬流感( h1n1病毒)病毒可以診斷感染,但無法為臨床診斷及時提供結果。病毒分離陰性并不能排除感染豬流感( h1n1病毒)病毒。

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