丙二酰脲類反應：與銀鹽的反應。巴比妥藥物在碳酸鈉溶液中振搖使溶，濾液中逐滴加入硝酸銀試液，即生成白色沉淀，振搖，沉淀即溶解；繼續(xù)滴加過量的硝酸銀試液，沉淀不再溶解，前者的白色沉淀為硝酸銀溶液局部過濃，呆滯出現(xiàn)局部巴比妥二銀鹽渾濁，但振搖后，溶液中為可溶性的一銀鹽，繼續(xù)滴加硝酸銀過量，則產(chǎn)生難溶性的巴比妥二銀鹽沉淀，不再溶解。
與銅鹽的反應。巴比妥類藥物在吡啶溶液中與銅吡啶試液作用，生成配位化合物，顯紫色或生成紫色沉淀；硫噴妥鈉藥物顯綠色。
熔點測定：苯巴比妥鈉的鑒別。溶于水加稍過量稀鹽酸可析出苯巴比妥結(jié)晶，105℃干燥后測定熔點應為174～178℃。
司可巴比妥鈉的鑒別。加水溶解后加稀醋酸煮沸，放冷，析出結(jié)晶，濾過，70℃干燥后測定熔點約為97℃。
巴比妥類藥物鈉鹽的鑒別：焰色反應。火焰鮮黃色。
與醋酸氧鈾鋅反應。取巴比妥類鈉鹽藥物的重型溶液，加入醋酸氧鈾鋅試液，即生成黃色沉淀。
取代基或元素的反應：1.芳環(huán)取代基的反應與亞硝酸鈉-硫酸的反應。苯巴比妥含有苯環(huán)取代基，可與亞硝酸鈉-硫酸反應，生成橙黃色產(chǎn)物，并隨即轉(zhuǎn)成橙紅色。
與甲醛-硫酸的反應。苯巴比妥與甲醛-硫酸反應，生成玫瑰紅色環(huán)。其它無苯基取代的巴比妥類藥物無此反應。
2.不飽和烴取代基的反應。司可巴比妥鈉結(jié)構(gòu)中含丙烯基，可與碘試液發(fā)生加成反應，使碘試液棕黃色消失。
3.硫元素的反應。硫噴妥鈉分子結(jié)構(gòu)中含有硫元素，在氫氧化鈉試液中可與鉛離子反應，生成白色沉淀；加熱后，沉淀轉(zhuǎn)變?yōu)楹谏蚧U。
苯巴比妥中特殊雜質(zhì)：酸度，乙醇溶液的澄清度，中性或堿性物質(zhì)。
苯巴比妥片溶出度測定用槳法，異戊巴比妥片溶出度測定用轉(zhuǎn)籃法。
苯巴比妥的含量測定：銀量法，采用銀-玻璃電極系統(tǒng)，硝酸銀電位滴定法，每1ml硝酸銀滴定液（0.1mol/l）相當于23.22mg的c12h12n2o3.司可巴比妥鈉含量測定：溴量法。分子結(jié)構(gòu)中的丙烯基可與溴發(fā)生加成反應。測定原料和膠囊。過量的溴與碘化鉀作用生成碘，用硫代硫酸鈉液滴定。
每1ml溴滴定液（0.1mol/l）相當于13.01mg的c12h17n2nao3.注射用硫噴妥鈉的含量測定：紫外分光光度法。用對照品比較。每1mg的硫噴妥相當于1.091mg的c11h19n2nao2s（硫噴妥鈉）。