縮合反應(yīng)。異煙肼的酰肼基可以和含羰基的試劑（如芳醛）發(fā)生縮合反應(yīng)。異煙肼與香草醛反應(yīng)，生成異煙腙，測(cè)定熔點(diǎn)供鑒別。
沉淀反應(yīng)。異煙肼分子中的吡啶環(huán)具有堿性，可以和重金屬鹽類（如氯化汞、硫酸銅、碘化鉍鉀）乙基苦味酸形成沉淀。異煙肼和氯化汞可生成白色沉淀。和硫酸銅-枸櫞酸試液反應(yīng)，先產(chǎn)生綠色沉淀，加熱，沉淀變?yōu)榧t棕色。
尼克剎米的鑒別：戊烯二醛反應(yīng)。屬吡啶環(huán)的開環(huán)反應(yīng)。尼克剎米分子中的吡啶環(huán)與溴化氰反應(yīng)，開環(huán)形成戊烯二醛的衍生物，再與苯胺縮合，形成黃色的希夫氏堿。
異煙肼也可發(fā)生戊烯二醛反應(yīng)，但需先用高錳酸鉀或溴水氧化為異煙酸，再與溴化氰作用。
與苯胺縮合形成黃色至棕黃色產(chǎn)物，與聯(lián)苯胺紫外分光光度法形成淡紅至紅色產(chǎn)物。
水解反應(yīng)。尼克剎米分子中的酰胺基在堿性條件下可水解，加氫氧化鈉試液，加熱，即有二乙胺臭味逸出，能使?jié)駶?rùn)的紅色石蕊試紙變成藍(lán)色。
沉淀反應(yīng)。尼克剎米分子中的吡啶環(huán)也可以和重金屬離子反應(yīng)。尼克剎米和硫酸銅及硫氰酸銨作用，生成草綠色配位化合物的沉淀。
異煙肼中游離肼的檢查：薄層色譜法。肼的檢測(cè)限為0.1μg，控制限量為0.02%.異煙肼的含量測(cè)定：異煙肼分子中的酰肼基具有還原性，可采用氧化還原滴定法測(cè)定其含量。溴酸鉀法。甲基橙作指示劑，溴酸鉀滴定止粉紅色消失。每1ml的溴酸鉀滴定液（0.1667mol/l）相當(dāng)于3.429mg的c6h7n3o.異煙肼的片劑、注射劑均采用溴酸鉀法測(cè)定含量。
還可使用溴量法、剩余碘量法測(cè)定含量，也可用非水溶液滴定法。
尼克剎米含量測(cè)定：非水溶液滴定法。溶劑：冰醋酸，指示劑：結(jié)晶紫，滴定液：高氯酸。至溶液藍(lán)綠色。每1ml高氯酸滴定液（0.1mol/l）相當(dāng)于17.82mg的c10h14n2o.紫外分光光度法。測(cè)定尼克剎米注射劑含量。注射劑的溶劑對(duì)非水溶液滴定法有干擾，所以采用本法。使用0.5%硫酸溶液溶解樣品，是為了使藥物呈離解狀態(tài)，易溶于水。