第六章  分光光度法
第一節(jié)  紫外可見(jiàn)分光光度法
一、基本原理
紫外--可見(jiàn)分光光度法：是根據(jù)物質(zhì)分子對(duì)波長(zhǎng)為200-760nm這一范圍的電磁波的吸收特性所建立起來(lái)的一種定性、定量和結(jié)構(gòu)分析方法。操作簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確度高、重現(xiàn)性好。
波長(zhǎng)長(zhǎng)(頻率小)的光線(xiàn)能量小，波長(zhǎng)短(頻率大)的光線(xiàn)能量大。
        100nm   200nm      400nm         800nm         400um       1m
                      通指
x-射線(xiàn)          紫外區(qū)            可見(jiàn)區(qū)           紅外區(qū)       微波區(qū)     無(wú)線(xiàn)電波區(qū)
beer-lambert定律： a=e l c   a--吸收度   e-吸收系數(shù)  l ---液層厚度   c---溶液濃度
吸收度濃度與厚度的關(guān)系。是吸收光度法的基本定律，重要前提是單色光。
摩爾吸收系數(shù)：指在一定波長(zhǎng)下，溶液濃度為1mol/l , 厚度為1cm時(shí)的吸收度，用  表示。
百分吸收系數(shù)：指在一定波長(zhǎng)下，溶液濃度為1%(w/v) , 厚度為1cm時(shí)的吸收度，用   表示。
影響beer定律因素：化學(xué)因素，光學(xué)因素
二、紫外--可見(jiàn)分光光度計(jì)：  主要部件：
1、 光源：要求光譜的光源，2、 氫燈和鎢燈(350nm)
3、 單色器：進(jìn)口狹縫、準(zhǔn)直鏡、色散元件(棱鏡和光柵)、聚焦透鏡和出口狹縫組成。
4、 吸收池：用光學(xué)玻璃制成的吸收池，5、 只能用于可見(jiàn)光區(qū)。用熔融石英(氧化硅)，6、 可見(jiàn)紫外光區(qū)。
7、 檢測(cè)器：光電池：(硒光電池：用于可見(jiàn)光；硅光電池：紫外可見(jiàn)光) 內(nèi)阻小，8、 易疲勞。
             光電管：內(nèi)阻高，電流易放大 。
9、 訊號(hào)處理和顯示器
三、定性與定量方法：
  (一)、定性鑒別：是多數(shù)有機(jī)化合物具有吸收光譜特征。一般用對(duì)比法。
1、對(duì)比吸收光譜特征數(shù)據(jù)  2、對(duì)比吸收度(或吸收系數(shù))比值  3、對(duì)比吸收光譜的一致性
  (二)、純度檢查：雜質(zhì)檢查與雜質(zhì)限量檢測(cè)
  (三)、含量測(cè)定：
       1、吸收系數(shù)法   2、標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法    3、對(duì)照法 
第二節(jié)   熒光分析法
熒光分析法：利用熒光的物理特性而進(jìn)行定性與定量測(cè)定的方法。熒光法比紫外可見(jiàn)靈敏。
熒光光度計(jì)：激發(fā)光源、樣品池、檢測(cè)器、濾光片和單色器。
第三節(jié)  紅外分光光度計(jì)
紅外線(xiàn)：波長(zhǎng)大于0.76um，小于500um的電磁波。  hooke定律來(lái)描述分子的伸縮振動(dòng)。
當(dāng)分子的振動(dòng)頻率與入射的紅外頻率相同時(shí)，分子對(duì)紅外產(chǎn)生吸收。伸縮振動(dòng)和彎曲振動(dòng)。
基頻峰：分子吸收一定頻率的紅外線(xiàn)，振動(dòng)能級(jí)由基態(tài)(v=0)躍遷至第一激發(fā)態(tài)時(shí)產(chǎn)生的吸收峰。
倍頻峰：振動(dòng)能級(jí)由基態(tài)躍至第二、三激發(fā)態(tài)。統(tǒng)稱(chēng)泛頻峰。
吸收峰：用于鑒別官能團(tuán)存在的吸收峰稱(chēng)特征吸收峰。
指紋區(qū)：1250-400cm (8.0-25um)的低頻區(qū)稱(chēng)為指紋區(qū)。
紅外分光光度計(jì)主要部件：光源、吸收池、單色器(棱鏡和光柵)和檢測(cè)器(真空熱電偶)及記錄裝置。